3 概述
钩端螺旋体是一种细长柔软螺旋体,广泛存在于多种野生动物与家畜体内,可引起人类及哺乳动物的全身性感染,带菌动物是钩端螺旋体的主要传染源,以接触传播为主。在我国鼠和猫是主要传染源。当人感染后,采集发病2周的血液检查血清IgM抗体,对早期诊断钩端螺旋体病有重要价值。2~4周后出现IgG抗体,以后以IgG抗体为主。
5 检查名称
8 试剂
(1)抗原制备:
①提取致敏物:将钩端螺旋体培养物(如黄疸出血热型)浓缩至菌数为100亿/ml。加苯酚至最终浓度为0.3%,使溶菌,取0.3%苯酚菌液1ml加无水乙醇9ml,置40℃冰箱24h,使抗原沉淀,然后2000r/min离心10min,取沉淀加硼酸缓冲液(pH8.2)至原量,即成致敏物。
②胶乳处理:取10%胶乳液3ml加1%胰蛋白酶液(硼酸缓冲液配制)1ml及硼酸缓冲液6ml,56℃水浴24h,取出用4000r/min离心45min,弃上清液,沉淀用硼酸缓冲液,稀释至5ml。
③致敏法:取致敏物10ml徐徐加入处理胶乳10ml,边加边摇,放入56℃水浴中24~48h(每天摇2~3次)。取出放室温3~5天测定后应用。
④抗原测定:取免疫血清、阳性患者血清、阴性血清及生理盐水各1滴,分别滴于玻片上,各加致敏胶乳抗原1滴,混匀,观察结果。如免疫血清及阳性血清均发生明显凝集,阴性血清及生理盐水仍为均匀乳状者,即可应用。