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质粒
质粒是环状双链DNA分子,同线状DNA分子相比,围绕双螺旋主轴连续排列的核苷酸的旋转角度稍有变动,就更容易使DNA分子的构象发生改变,即出现超螺旋的(supercoiled)构象。质粒载体的大小同宿主细胞生长延缓的程度呈正相关,这可能是由于质粒载体相对分子质量大,则对宿主细胞DNA复制的负荷更大的缘故。
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定点突变
概念定点突变是指通过聚合酶链式反应(PCR)等方法向目的DNA片段(可以是基因组,也可以是质粒)中引入所需变化(通常是表征有利方向的变化),包括碱基的添加、删除、点突变等。)正反向引物的延伸产物退火后配对成为带缺刻的开环质粒。单酶切反应产物,直接转化EcoliBMH71-18mutS(错配修复缺陷株)。
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大肠埃希杆菌性胃肠炎
(1)不耐热肠毒素(LT):类似霍乱弧菌的肠毒素,可刺激小肠上皮细胞腺苷环化酶,使ATP转化为cAMP,促进小肠液体过度分泌,超过肠道再吸收能力,以致出现腹泻。常用药有诺氟沙星、氧氟沙氟沙氟沙星、多西环素、复方磺胺甲噁甲噁甲噁唑、新霉素、卡那霉素、多黏菌素B、庆大霉霉素、氨苄西林、呋喃唑酮等。
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基因工程
自1977年成功地用大肠杆菌生产生长激素释放抑制因子以来,人胰岛素、人生长激素、胸腺素、干扰素、尿激酶、肝火病毒疫菌、口蹄疫疫菌、腹泻疫菌和肿瘤坏死因子等数十种基因工程产品相继问世;目前此法已很少采用。第二步:把目的基因接到某种运载体上,常用的运载体有能够和细菌共生的质粒、温和噬菌体(病毒)等。
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冻干基因工程α1b干扰素
冻干基因工程α1b干扰素制造及检定规程本品系用从健康人白细胞中获得的α1b干扰素基因重组质粒,转染大肠杆菌,使之高效表达人α1b干扰素,经高度纯化后冻干制成。用于治疗慢性乙型肝炎、丙型肝炎和毛细胞白血病等疾病。1.4.3种子液的制备将菌种接种M9CA培养基,在摇床中培养至OD值在0.4~9.3无菌试验同8.2项。
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噬粒
噬粒(phagemid或phasmid)是由质粒载体和单链噬菌体载体构建成的。两者除了多克隆位点的序列正好相反外,其余的序列都是相同的,它们可在宿主细菌内像质粒一样地复制。辅助噬菌体是一类自身DNA复制效率极低的突变型,但可为宿主细胞的质粒DNA提供的复制和包装所需的蛋白酶和外壳蛋白。
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双元载体
双元载体系统,包括两个质粒,一个是带有T-DNA的微型质粒(双元Ti载体),一个是带有Vir区的辅助质粒。根癌农杆菌(Agrobacteriumtumefaciens)是一种革兰氏阴性土壤细菌,能够通过感染植物的伤口,将其Ti质粒上一段含有植物激素和冠瘿碱合成酶基因的DNA转移并整合至植物受体的基因组中。
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重组质粒
在质粒载体上进行克隆,从原理上说是很简单的,先用限制性内切酶切割质粒DNA和目的DNA片段,然后体外使两者相连接,再用所得到重组质粒转化细菌,即可完成。也可在PCR扩增时,在DNA片段两端人为加上不同酶切位点以便与载体相连。3、带有平末端是由产生平末端的限制酶或核酸外切酶消化产生,或由DNA聚合酶补平所致。
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PRD1
中文名称:肠杆菌噬菌体PRD1英文名称:EnterobacteriaphagePRD1分类类型:种分类:复层噬菌体科复层噬菌体属肠杆菌噬菌体PRD1GeneBank编号:[69077]肠杆菌噬菌体PRD1基本特性:复层噬菌体科是含生物膜的一群普通噬菌体,可以分为两个亚群,一个亚群感染革兰氏阳性菌,另一个亚群感染革兰氏阴性菌。P5也可作为三聚体存在。
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肠杆菌噬菌体PRD1
中文名称:肠杆菌噬菌体PRD1英文名称:EnterobacteriaphagePRD1分类类型:种分类:复层噬菌体科复层噬菌体属肠杆菌噬菌体PRD1GeneBank编号:[69077]肠杆菌噬菌体PRD1基本特性:复层噬菌体科是含生物膜的一群普通噬菌体,可以分为两个亚群,一个亚群感染革兰氏阳性菌,另一个亚群感染革兰氏阴性菌。P5也可作为三聚体存在。
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黏粒
黏粒英文cosmid,指带有黏端位点(C0s)的质粒。黏粒在克隆了外源DNA在体外包装成噬菌体颗粒后,可以感染宿主菌并在细菌内按照丸噬菌体DNA的方式环化起来。但黏粒载体不含有λ噬菌体的全部必要基因,因此不会使宿主菌裂解,无法形成子代噬菌体颗粒。黏粒自身相对分子质量较小,一般只有5~④能与有同源序列的质粒进行重组。
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物理图
物理图是指标明一些界标(例如限制酶的切点、基因等)在DNA上的位置,图距以物理长度为单位,例如染色体的带区、核苷酸对数目等。(2)YAC克隆:YAC是由质粒pBR322、酵母的着丝粒、四膜虫rDNA的端粒、酵母的自主复制序列(ARS)以及一些选择标记基因构成。呈环状结构时,可以质粒方式在原核细胞中增殖复制。
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遗传学
细胞遗传学时期大致是1910~分子遗传学是在微生物遗传学和生物化学的基础上发展起来的。目前广泛使用的模式生物包括:大肠杆菌(Escherichiacoli)、酿酒酵母(Saccharomycescerevisiae)、拟南芥(Arabidopsisthaliana)、线虫(Caenorhabditiselegans)、果蝇(Drosophilamelanogaster)以及小鼠(Musmusculus)。
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重组B亚单位/菌体霍乱疫苗(肠溶胶囊)
7天眼窝取血,分离血清并将免疫组各只小鼠血清和对照组各只小鼠血清分别等量混合。将上述免疫血清稀释至适宜稀释度,以未免疫组小鼠血清为对照,采用间接酶联免疫法分别测定免疫血清中霍乱弧菌抗体和CTB抗体。1.1.3种子批的传代:主种子批菌种启开后传代次数不得超过5代;涂片染色镜检应为革兰氏阴性短小弧杆菌。
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GBZ/T 240.8—2011 化学品毒理学评价程序和试验方法 第8部分:鼠伤寒沙门氏菌回复突变试验
5试验概述:鼠伤寒沙门氏组氨酸营养缺陷型菌株不能合成组氨酸,故在缺乏组氨酸的培养基上,仅有少数自发回复突变的细菌生长。6.3.1.20.5mmol/L组氨酸-0.5mmol/L生物素溶液成分D-生物素(相对分子质量244)122mgL-组氨酸(相对分子质量155)78mg无菌蒸馏水至1000mL不宜进行高压灭菌处理,使用无菌玻璃器皿配制。
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老年人阳性杆菌肺炎
疾病别名老年阳性杆菌肺炎疾病代码ICD:J15.8疾病分类老年病科疾病概述革兰阳性杆菌肺炎是由革兰阳性杆菌感染所致,因老年人免疫功能低下特别易患革兰阳性杆菌肺炎,其次见于新生儿,孕妇等患者。2.细菌学检查确诊依靠从伤口分泌液、皮肤焦痂、痰、血液、呕吐物、粪便以及脑脊液中直接涂片检查或培养分离到炭疽杆菌。
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口服福氏宋内菌痢疾双价活疫苗
16g小鼠40只,分为4组,每组10只,其中两组为免疫组,每只皮下注射总菌2.5×109,另两组为生理氯化钠溶液对照组。免疫血清对福氏2a型志贺菌的凝集效价不低于1:1280,对宋内志贺菌效价应不低于1:320,2/3家兔血清之凝集效价达到上述要求即为合格。罕见不良反应:(1)严重发热反应:应给予对症处理,以防高热惊厥。
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冻干基因工程α2a干扰素
冻干基因工程α2a干扰素制造及检定规程本品系用带有人α2a型干扰素基因重组质粒的大肠杆菌,经发酵培养及单克隆抗体亲和层析后精制而成。10个菌落,分别培养后保存,然后每个菌落分别进行干扰素表达量测定,至少重复一次,选出其中干扰素表达量最高的一份,供生产制备种子液用,其表达量应符合原始菌种的表达量。
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重组人干扰素α2b软膏(假单胞菌)
2.2原液:2.2.1种子液制备:将检定合格的工作种子批菌种接种于适宜的培养基(可含适量抗生素)中培养。2.3软膏剂制备采用的基质:应符合软膏剂基质要求(2010年版药典三部附录ⅠG)。3检定:3.1原液检定:3.1.1生物学活性:依法测定(2010年版药典三部附录ⅩC)。5使用说明:应符合“生物制品包装规程”规定和批准的内容。
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注射用重组人干扰素γ
注射用重组人干扰素γ药典标准:品名:中文名:注射用重组人干扰素γ汉语拼音:ZhusheyongChongzuRenGanraosuγ英文名:RecombinantHumanInterferonγforInjection定义、组成及用途:本品系由高效表达人干扰素γ基因的大肠杆菌,经发酵、分离和高度纯化后获得的重组人干扰素γ冻干制成。
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注射用重组人白介素-2
注射用重组人白介素-2药典标准:品名:中文名:注射用重组人白介素-2汉语拼音:ZhusheyongChongzuRenBaijiesu-2英文名:RecombinantHumanInterleukin-2forInjection定义、组成及用途:本品系由高效表达人白细胞介素-2(简称人白介素-2)基因的大肠杆菌,经发酵、分离和高度纯化后获得的重组人白介素-2冻干制成。
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重组人白介素-2注射液
重组人白介素-2注射液药典标准:品名:中文名:重组人白介素-2注射液汉语拼音:ChongzuRenBaijiesu-2Zhusheye英文名:RecombinantHumanInterleukin-2Injection定义、组成及用途:本品系由高效表达人白细胞介素-2(简称人白介素-2)的大肠杆菌,经发酵、分离和高度纯化后获得的重组人白介素-2制成。乙腈含量不高于0.0004%。
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注射用重组人干扰素α2b(假单胞菌)
2.1.3.5生化反应:不液化明胶,不水解淀粉和聚β-羟基丁酸酯(2010年版药典三部附录XIV),不能利用反硝化作用进行厌氧呼吸,能够合成荧光色素。2.1.3.9目的基因核苷酸序列检查(工作种子批可免做):目的基因核昔酸序列应与批准的序列相符。3检定:3.1原液检定:3.1.1生物学活性:依法测定(2010年版药典三部附录ⅩC)。
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重组人干扰素α2b注射液(假单胞菌)
2.1.3.5生化反应:不液化明胶,不水解淀粉和聚β-羟基丁酸酯(2010年版药典三部附录XIV),不能利用反硝化作用进行厌氧呼吸,能够合成荧光色素。2.1.3.9目的基因核苷酸序列检查(工作种子批可免做):目的基因核苷酸序列应与批准的序列相符。3检定:3.1原液检定:3.1.1生物学活性:依法测定(2010年版药典三部附录ⅩC)。
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重组人干扰素α2b喷雾剂(假单胞菌)
2.1.3.8质粒检查:该质粒的酶切图谱应与原始重组质粒的相符。2.1.3.9目的基因核苷酸序列检查(工作种子批可免做):目的基因核苷酸序列应与批准的序列相符。3检定:3.1原液检定:3.1.1生物学活性:依法测定(2010年版药典三部附录ⅩC)。3.2半成品检定无菌检查:依法检查(2010年版药典三部附录ⅫA),应符合规定。
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重组人干扰素α1b滴眼液
重组人干扰素α1b滴眼液药典标准:品名:中文名:重组人干扰素α1b滴眼液汉语拼音:ChongzuRenGanraosuα1bDiyanye英文名:RecombinantHumanInterferonα1bEyeDrops定义、组成及用途:本品系由高效表达人干扰素α1b基因的大肠杆菌,经发酵、分离和高度纯化后获得的重组人干扰素α1b制成。含适宜稳定剂。
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注射用重组人干扰素α2a
注射用重组人干扰素α2a药典标准:品名:中文名:注射用重组人干扰素α2a汉语拼音:ZhusheyongChongzuRenGanraosuα2a英文名:RecombinantHumanInterferonα2aforInjection定义、组成及用途:本品系由高效表达人干扰素α2a基因的大肠杆菌,经发酵、分离和高度纯化后获得的重组人干扰素α2a冻干制成。
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重组人干扰素α2a注射液
重组人干扰素α2a注射液药典标准:品名:中文名:重组人干扰素α2a注射液汉语拼音:ChongzuRenGanraosuα2aZhusheye英文名:RecombinantHumanInterferonα2aInjection定义、组成及用途:本品系由高效表达人干扰素α2a基因的大肠杆菌,经发酵、分离和高度纯化后获得的重组人干扰素α2a制成。2.2.7原液检定:按3.1项进行。
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注射用重组人白介素-2 (Ⅰ)
2.1.3.8目的基因核苷酸序列检查(工作种子批可免做):目的基因核苷酸序列应与批准的序列相符。3.1.11紫外光谱:用水或生理氯化钠溶液将供试品稀释至约100~3.1.13N端氨基酸序列(至少每年测定1次):用氨基酸序列分析仪测定,N端序列为:(Met)-Ala-Pro-Thr-Ser-Ser-Ser-Thr-Lys-Lys-Thr-Gln-Leu-Gln-Leu-Glu。
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注射用重组人粒细胞巨噬细胞刺激因子
2制造:2.1工程菌菌种:2.1.1名称及来源:重组人粒细胞巨噬细胞刺激因子工程菌株系由带有人粒细胞巨噬细胞刺激因子基因的重组质粒转化的大肠杆菌菌株。2.2原液:2.2.1种子液制备:将检定合格的工作种子批菌种接种于适宜的培养基(可含适量抗生素)中培养。发酵液应定期进行质粒丢失率检查(2010年版药典三部附录ⅨG)。
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重组牛碱性成纤维细胞生长因子外用溶液
2制造:2.1工程菌菌种:2.1.1名称及来源:重组牛碱性成纤维细胞生长因子工程菌株系由带有牛碱性成纤维细胞生长因子基因的重组质粒转化的大肠杆菌菌株。2.2原液:2.2.1种子液制备:将检定合格的工作种子批菌种接种于适宜的培养基(可含适量抗生素)中培养。发酵液应定期进行质粒丢失率检查(2010年版药典三部附录ⅨG)。
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外用重组牛碱性成纤维细胞生长因子
2制造:2.1工程菌菌种:2.1.1名称及来源:重组牛碱性成纤维细胞生长因子工程菌株系由带有牛碱性成纤维细胞生长因子基因的重组质粒转化的大肠杆菌菌株。2.2原液:2.2.1种子液制备:将检定合格的工作种子批菌种接种于适宜的培养基(可含适量抗生素)中培养。发酵液应定期进行质粒丢失率检查(2010年版药典三部附录ⅨG)。
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重组牛碱性成纤维细胞生长因子凝胶
2制造:2.1工程菌菌种:2.1.1名称及来源:重组牛碱性成纤维细胞生长因子工程菌株系由带有牛碱性成纤维细胞生长因子基因的重组质粒转化的大肠杆菌菌株。2.2原液:2.2.1种子液制备:将检定合格的工作种子批菌种接种于适宜的培养基(可含适量抗生素)中培养。2.2.6原液检定:按3.1项进行。3.3.4生物学活性:应为标示量的70%~
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外用重组人表皮生长因子
外用重组人表皮生长因子药典标准:品名:中文名:外用重组人表皮生长因子汉语拼音:WaiyongChongzuRenBiaopiShengzhangyinzi英文名:RecombinantHumanEpidermalGrowthFactorforExternalUse定义、组成及用途:本品系由高效表达人表皮生长因子基因的大肠杆菌,经发酵、分离和高度纯化后获得的重组人表皮生长因子冻干制成。
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重组人表皮生长因子外用溶液(Ⅰ)
2制造:2.1工程菌菌种:2.1.1名称及来源:重组人表皮生长因子衍生物工程菌株系由带有人工合成人表皮生长因子衍生物基因(较天然人表皮生长因子5'端多3个氨基酸Ala-Arg-Ile编码序列)的重组质粒转化的大肠杆菌菌株。2.2原液:2.2.1种子液制备:将检定合格的工作种子批菌种接种子适宜的培养基(可含适宜抗生素)中培养。
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重组人粒细胞刺激因子注射液
2.2原液:2.2.1种子液制备:将检定合格的工作种子批菌种接种于适宜的培养基(可含适量抗生素)中培养。以A相(三氟乙酸-水溶液:量取1.0ml三氟乙酸加水至1000ml,充分混匀)、B相(三氟乙酸-乙腈溶液:量取1.0ml三氟乙酸加入色谱纯乙腈至1000ml,充分混匀)为流动相,在室温条件下,进行梯度洗脱(0~
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注射用重组人干扰素α1b
注射用重组人干扰素α1b药典标准:品名:中文名:注射用重组人干扰素α1b汉语拼音:ZhusheyongChongzuRenGanraosuα1b英文名:RecombinantHumanInterferonα1bforInjection定义、组成及用途:本品系由高效表达人干扰素α1b基因的大肠杆菌,经发酵、分离和高度纯化后获得的重组人干扰素α1b冻干制成。
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重组人干扰素α1b注射液
重组人干扰素α1b注射液药典标准:品名:中文名:重组人干扰素α1b注射液汉语拼音:ChongzuRenGanraosuα1bZhusheye英文名:RecombinantHumanInterferonα1bInjection定义、组成及用途:本品系由高效表达人干扰素α1b基因的大肠杆菌,经发酵、分离和高度纯化后获得的重组人干扰素α1b制成。2.2.7原液检定:按3.1项进行。
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重组牛碱性成纤维细胞生长因子滴眼液
2制造:2.1工程菌菌种:2.1.1名称及来源:重组牛碱性成纤维细胞生长因子工程菌株系由带有牛碱性成纤维细胞生长因子基因的重组质粒转化的大肠杆菌菌株。2.2原液:2.2.1种子液制备:将检定合格的工作种子批菌种接种子适宜的培养基(可含适量抗生素)中培养,供发酵罐接种用。3.3.4生物学活性:应为标示量的70%~
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microRNAs
概述microRNAs(miRNAs)是一种小的,类似于siRNA的分子,由高等真核生物基因组编码,miRNA通过和靶基因mRNA碱基配对引导沉默复合体(RISC)降解mRNA或阻碍其翻译。如果miRNA与靶位点完全互补(或者几乎完全互补),那么这些miRNA的结合往往引起靶mRNA的降解(在植物中比较常见)。miRNA的上调可用于鉴定功能获得表型;
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重组人干扰素α2b栓
重组人干扰素α2b栓药典标准:品名:中文名:重组人干扰素α2b栓汉语拼音:ChongzuRenGanraosuα2bShuan英文名:RecombinantHumanInterferonα2bVaginalSuppository定义、组成及用途:本品系由高效表达人干扰素α2b基因的大肠杆菌,经发酵、分离和纯化后获得的重组人干扰素α2b,加入栓剂基质中,经成型、挂膜制成。
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注射用重组链激酶
注射用重组链激酶药典标准:品名:中文名:注射用重组链激酶汉语拼音:ZhusheyongChongzuLianjimei英文名:RecombinantStreptokinaseforInjection定义、组成及用途:本品系由高效表达链激酶基因的大肠杆菌,经发酵、分离和高度纯化后获得的重组链激酶冻干制成。2.1.3.7质粒检查:该质粒的酶切图谱应与原始重组质粒的相符。
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重组人干扰素α2b滴眼液
重组人干扰素α2b滴眼液药典标准:品名:中文名:重组人干扰素α2b滴眼液汉语拼音:ChongzuRenGanraosuα2bDiyanye英文名:RecombinantHumanInterferonα2bEyeDrops定义、组成及用途:本品系由高效表达人干扰素α2b基因的大肠杆菌,经发酵、分离和高度纯化后获得的重组人干扰素α2b制成。含适宜稳定剂。
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重组人干扰素α2b注射液
重组人干扰素α2b注射液药典标准:品名:中文名:重组人干扰素α2b注射液汉语拼音:ChongzuRenGanraosuα2bZhusheye英文名:RecombinantHumanInterferonα2bInjection定义、组成及用途:本品系由高效表达人干扰素α2b基因的大肠杆菌,经发酵、分离和高度纯化后获得的重组人干扰素α2b制成。2.2.7原液检定:按3.1项进行。
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注射用重组人干扰素α2b
注射用重组人干扰素α2b药典标准:品名:中文名:注射用重组人干扰素α2b汉语拼音:ZhusheyongChongzuRenGanraosuα2b英文名:RecombinantHumanInterferonα2bforInjection定义、组成及用途:本品系由高效表达人干扰素α2b基因的大肠杆菌,经发酵、分离和高度纯化后获得的重组人干扰素α2b冻干制成。
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miRNA
概述microRNAs(miRNAs)是一种小的,类似于siRNA的分子,由高等真核生物基因组编码,miRNA通过和靶基因mRNA碱基配对引导沉默复合体(RISC)降解mRNA或阻碍其翻译。如果miRNA与靶位点完全互补(或者几乎完全互补),那么这些miRNA的结合往往引起靶mRNA的降解(在植物中比较常见)。miRNA的上调可用于鉴定功能获得表型;
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重组人干扰素α2a栓
2制造:2.1工程菌菌种:2.1.1名称及来源:重组人干扰素α2a工程菌株系由带有人干扰素α2a基因的重组质粒转化的大肠杆菌菌株。2.2原液:2.2.1种子液制备:将检定合格的工作种子批菌种接种于适宜培养基(可含适量抗生素)中培养。3检定:3.1原液检定:3.1.1生物学活性:依法测定(2010年版药典三部附录ⅩC)。
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重组人干扰素α2b凝胶
重组人干扰素α2b凝胶药典标准:品名:中文名:重组人干扰素α2b凝胶汉语拼音:ChongzuRenGanraosuα2bNingjiao英文名:RecombinantHumanInterferonα2bGel定义、组成及用途:本品系由高效表达人干扰素α2b基因的大肠杆菌,经发酵、分离和高度纯化后获得的重组人干扰素α2b,加入凝胶基质制成。
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重组人干扰素α2b乳膏
重组人干扰素α2b乳膏药典标准:品名:中文名:重组人干扰素α2b乳膏汉语拼音:ChongzuRenGanraosuα2bRugao英文名:RecombinantHumanInterferonα2bCream定义、组成及用途:本品系由高效表达人干扰素α2b基因的大肠杆菌,经发酵、分离和高度纯化后获得的重组人干扰素α2b,加入乳膏基质制成。即为重组人干扰素α2b原液。
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P1样噬菌体属
病毒粒子CsCl浮力密度是1.48g/cm3。P1样噬菌体属病毒基因组大小约100kbp,G+C含量为46%。基因组线形,包括约100个基因,相关功能的基因通常在基因组的几个区域分布。基因组已循环排列,有8-12%的末端亢余,包括一个重组热点(lox-cre)。噬菌体作为质粒维持(每个细胞1-2个质粒),或者整合到细菌染色质的特异位点维持。