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反转录酶
反转录酶(Reversetranscripatase)是以RNA为模板指导三磷酸脱氧核苷酸合成互补DNA(cDNA)的酶。这种酶需要镁离子或锰离子作为辅助因子,当以mRNA为模板时,先合成单链DNA(ssDNA),再在反转录酶和DNA聚合酶Ⅰ作用下,以单链DNA为模板合成“发夹”型的双链DNA(dsDNA),再由核酸酶S1切成二条单链的双链DNA。
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人类T 淋巴细胞病毒感染
(3)淋巴瘤性ATL:无淋巴细胞增多的淋巴结病。HTLV基因编码:①gag基因编码产生p19、p24、p15抗原;病理生理HTLV进入人体后,通过包膜糖蛋白分子与血液及组织中CD4+T细胞上CD4分子结合而侵入细胞,其基因组在反转录酶作用下形成前病毒DNA,并在宿主细胞染色体的许多位点整合,使受染T细胞增生转化,最后发展为T细胞白血病。
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基因工程
自1977年成功地用大肠杆菌生产生长激素释放抑制因子以来,人胰岛素、人生长激素、胸腺素、干扰素、尿激酶、肝火病毒疫菌、口蹄疫疫菌、腹泻疫菌和肿瘤坏死因子等数十种基因工程产品相继问世;目前此法已很少采用。第二步:把目的基因接到某种运载体上,常用的运载体有能够和细菌共生的质粒、温和噬菌体(病毒)等。
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长散在重复序列
长散在重复序列(10nginterspersednuclearelements,LINE),意为散在分布的长细胞核因子,是散在分布在哺乳动物基因中的一类重复序列,这种重复序列较长;L1以及由L1编码的反转录酶作用于其他非自主反转录转座子以后所生成的DNA序列,加起来至少占人类基因组全长的四分之一。许多真核细胞中都发生3'转导作用。
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cDNA
cDNA为具有与某RNA链呈互补的碱基序列的单链DNA即complementaryDNA之缩写,或此DNA链与具有与之互补的碱基序列的DNA链所形成的DNA双链。相反地对应于在原来基因中没有的而在mRNA存在的3′末端的多A序列等的核苷序列上,与exon序列、先导序列以及后续序列等一起反映出mRNA结构。cDNA同样可以被克隆。
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中心法则
中心法则是现代遗传学关于遗传信息在核酸与蛋白质两类生物大分子之间传递的基本原理。逆转录酶在基因工程中是一种很重要的酶,它能以已知的mRNA为模板合成目的基因。任何一种假设都要经受科学事实的检验。所以说,PrPsc进入宿主细胞并不是自我复制,而是将细胞内基因编码产生的PrPc变成PrPsc。
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反录病毒
反录病毒是具有反转录酶并能引起多种动物发生肿瘤和慢性病的一类病毒。重要的种类如:①马传染性贫血病病毒。马属动物(马、骡、驴)是唯一可以自然感染的动物,主要通过马虻传播。人T细胞淋巴瘤白血病病毒(HTLV)。HTLV-Ⅲ病毒可能是艾滋病的病因。牛白血病病毒(BLV)能使牛发生恶性淋巴肉瘤,其靶细胞是B淋巴细胞。
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蜈蚣藻
拼音名:WúGōnɡZǎo别名:海赤菜、冬家烂、膏菜来源:药材基源:为隐丝藻科植物蜈蚣藻及舌状蜈蚣藻的藻体。生境分布:生态环境:1.生于外海及浪较大的中潮带岩石上或石沼中。具羽状分枝1-3次,对生或互生。体表有时可见颗粒状囊果。药理作用:蜈蚣藻的多糖提取物具有抑制反转录酶的活性,用作反转录病毒的抑制剂。
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漂移病毒属
果蝇gypsy病毒基因组分子大小为7469bp,其中包括两个482bp的LTR。基因组RNA含有一个编码主要结构蛋白的ORF;这种蛋白是反转录蛋白囊膜蛋白的类似物,它通过疏水跨膜区域位于病毒膜,加工位点与跨膜和表面区域的切割相似。在转座子的中部还含有若干开读框(ORF),与反转录病毒的gag,pol及env基因同源。
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远源病毒属
病毒插入的侧翼是5bp直接重复,重复来源于插入位点,在人蛔虫基因组中大约分布50个拷贝的病毒基因组。反转录由tRNAarg引导,它与5’-LTR下游6bp的碱基退火。远源病毒属成员的宿主包括脊椎动物、昆虫和线虫,在用反转录酶进行的系统发育分析中,本属成员与变位病毒属和漂移病毒属成员能很好地分离。
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转座因子
最明显的效应是转座子能够启动重组,最后导致基因组重排。反转录转座因子的转座作用可以引起非编码序列DNA的重排,当基因组的一段DNA序列在RNA聚合酶的作用下产生其RNA拷贝,然后在反转录酶催化下,以这个RNA为模板合成DNA拷贝,然后插入基因组的其他部位,由此既增加了基因组的大小,又增加了重复序列。
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半病毒属
8.5Kb之间,组织结构上与反转录病毒的原病毒DNA很相似。Copia家族的LTR长度为276bp,插入靶位点时产生的两翼同向重复序列(DER)长约3~Copia家族成员与细菌转座子不同,能以环状DNA的形式独立存在。Copia因子转座活性很高,但大部分留在细胞核内。mRNA具有较长的ORF,编码反转录酶、整合酶以及核酸结合蛋白。
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逆转录聚合酶链反应
逆转录聚合酶链反应(ReversetranscriptionPCR;RT-PCR技术灵敏而且用途广泛,可用于检测细胞中基因表达水平,细胞中RNA病毒的含量和直接克隆特定基因的cDNA序列。用于反转录的引物可视实验的具体情况选择随机引物、OligodT及基因特异性引物中的一种。对于短的不具有发卡结构的真核细胞mRNA,三种都可。
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RT-PCR
逆转录聚合酶链反应(ReversetranscriptionPCR;RT-PCR技术灵敏而且用途广泛,可用于检测细胞中基因表达水平,细胞中RNA病毒的含量和直接克隆特定基因的cDNA序列。用于反转录的引物可视实验的具体情况选择随机引物、OligodT及基因特异性引物中的一种。对于短的不具有发卡结构的真核细胞mRNA,三种都可。
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DNA纯系化
与此相反,作为目标的基因从特异出现的组织中将信使RNA(m-RNR)分提,通过反转录酶合成与mRNA互补的DNA(cDNA),将此DNA与载体结合而进行克隆化,这是最常用的方法。此外,对巳知氨基酸序列的蛋白质,认为在遗传密码表中有其相反对应的DNA碱基序列,据此也可被用于人工合成的DNA克隆化的方法中。
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DNA克隆化
与此相反,作为目标的基因从特异出现的组织中将信使RNA(m-RNR)分提,通过反转录酶合成与mRNA互补的DNA(cDNA),将此DNA与载体结合而进行克隆化,这是最常用的方法。此外,对巳知氨基酸序列的蛋白质,认为在遗传密码表中有其相反对应的DNA碱基序列,据此也可被用于人工合成的DNA克隆化的方法中。
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端粒顺序
端粒顺序是线性染色体两端的特殊序列,这种序列广泛分布在原生动物、真菌、植物和哺乳动物的染色体中,并且在序列组成上十分相似,富含G,且由短的基本序列随机串联重复而成。端粒是由端粒酶合成的。同时在染色体的两端形成保护性的帽结构,使染色体的DNA免受核酸酶和其他不稳定因素的破坏和影响。
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假基因
1977年在爪蟾的5S基因系统中发现了假基因,以后在珠蛋白基因簇、免疫球蛋白基因簇以及组织相容性抗原基因簇中都发现有假基因,而且通常是散布于有活性的功能基因之间。假基因同cDNA一样没有内含子序列,也没有启动基因转录的启动子序列,而在5’端都有mRNA分子特有的多聚腺苷[poly(A)]序列。
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反转录转座子
除反转录病毒外,反转录转座子可以分成两类:一类是病毒超家族(viralsuperfamily),这类反转录转座子编码反转录酶或整合酶(integrases),能自主地进行转录,其转座的机制同反转录病毒相似,但不能像反转录病毒那样以独立感染的方式进行传播;