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转基因动物
转基因动物的基本操作是按体外重组DNA的常规方法,先将待转移的外源基因克隆在一个合适的表达载体上,将这个重组DNA分子在体外注入动物受精卵的细胞核中,然后将这个带有外源基因的受精卵植入雌性个体的子宫,使其完成胚胎发育。其中4头雌绵羊都产下杂合体羊羔,经过交配,下一代就得到了纯合的转基因绵羊。
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哈尔滨医科大学
微小核苷酸(miRNA)功能学研究,microRNA转基因动物模型建立研究,抗心律失常药物作用最佳靶点的研究,中国人类基因组计划研究,精准肝脏外科技术研究,同种异体劈裂脾移植研究,As2O3治疗M3型白血病和治疗实体瘤的研究,大骨节病病因学研究,心脏移植,双手移植,单前臂移植和大肠癌综合治疗等在国内外具有较大的影响。
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刘德培
在心血管疾病发病机制研究中,建立ApoAI载脂蛋白基因簇转基因动物模型并发现ApoCIII增强子的调控机制,发现A20在心梗后能明显改善心脏的综合功能,发现内皮细胞特异的III类去乙酰化酶SirtI能降低ApoE敲除鼠的动脉粥样硬化,发现对氧磷酶(PON)基因簇能抑制动脉粥样硬化斑块形成并稳定斑块。
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转基因技术
1982年,美国科学家采用基因工程把从大鼠细胞分离出来的大鼠生长素基因通过处理,用显微注射法注射入小鼠受精卵内,妊娠结果分娩出21只小鼠,其中7只带有大鼠生长激素基因,6只小鼠的生长速度非常快,超出同窝其他小鼠的1.8倍,成为“巨型小鼠”。
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基因转染
化学转染法1.DEAE-葡聚糖法DEAE葡聚是最早应用哺乳动物细胞转染试剂之一,DEAE-葡聚糖是阳离子多聚物,它与带负电的核酸结合后接近细胞膜而被摄取,用DEAE-葡聚糖转染成功地用用于瞬时表达的研究,但用于稳定转染却不是十分可靠。电穿孔靠脉冲电流在细胞膜上打孔而将核酸导入细胞内。