3 概述
糖鏈抗原50又稱糖類抗原50、癌抗原50,其是一種以唾液酸脂和唾液酸糖蛋白爲主的糖蛋白,也是一種腫瘤抗原。正常細胞表面的糖脂或糖蛋白在細胞信息的傳遞、生長和分化過程中起重要的作用。當細胞惡變時,由於糖基轉化酶失去活性或胚胎期的轉化酶重新激活導致細胞表面糖結構發生改變和抗原性質改變,而產生腫瘤標記物。糖鏈抗原50是一種非特異性的廣譜腫瘤標記物,與糖鏈抗原19-9有一定交叉抗原性,主要用於胰腺癌、結腸癌、直腸癌、胃癌的輔助診斷,其中胰腺癌病人升高最明顯。
5 糖鏈抗原50的醫學檢查
5.1 檢查名稱
5.2 分類
5.3 取材
5.4 糖鏈抗原50的測定原理
CA-50免疫放射測定是將C-50單克隆抗體包被到聚苯乙烯塑料珠上成爲固相抗體,與樣品(或標準)中CA-50抗原結合,加入125I-標記的C-50(標記抗體)形成三明治夾心模式的反應,經洗滌後測定固相珠的放射性,與標準抗原作出的標準曲線比較後定量。
5.5 試劑
(1)C-50單克隆抗體包被聚苯乙烯小珠:80粒,浸泡於0.05mol/L磷酸鹽緩衝液(pH值7.5)中備用。
(2)標準品:6瓶(0.5ml/瓶),CA-50含量分別爲0、5、10、20、40、80u/ml。直接用於實驗。
(3)保溫液:2瓶,每瓶8ml,內含緩沖劑、牛血清白蛋白、疊氮鈉及吐溫-20。直接用於實驗。
(4)125I-C-50單克隆抗體:1瓶(10ml),內含緩沖劑,直接用於實驗。
(5)質控血清:2瓶(0.5ml/瓶),CA-50含量分別爲20±5u/ml及70±5u/ml。
上述試劑均應置4℃冰箱內保存備用。
5.6 操作方法
(1)試管編號:1~2管爲總放射性(T)管,3~14管爲標準曲線管,15管以後爲控制血清及待測樣品。應準備兩套試管,一套供加樣反應用(亦可採用圓盤型塑料反應盤)。
(2)各反應管(除T管)分別加入C-50抗體包被小珠一粒,置37℃溫育16h(用塑料薄膜覆蓋上口,防液體揮發)。
(3)各管以水洗滌3次。
(4)將小珠移至相應測量管內,測定放射性計數。
5.7 正常值
0~20kU/L。
5.8 化驗結果臨牀意義
升高:見於胰腺癌(陽性率達87%)、結腸癌、直腸癌、胃癌、肺癌、肝癌、膽囊癌、膽管癌、卵巢癌、乳腺癌等惡性腫瘤。另外,潰瘍性結腸炎、肝硬化、黑色素瘤、淋巴瘤、自身免疫性疾病等也可升高。
5.9 附註
(1)惡性腫瘤中胰腺癌、膽道癌、膽囊癌陽性率均在80%以上,原發性肝癌陽性率爲72%、卵巢癌陽性率爲50%、大腸癌陽性率爲27%,乳腺癌、子宮癌和肝癌陽性率爲20%。
(2)本測定系統反應總體積爲250μl/管,爲保證溫育過程中抗體包被小珠能始終被反應液浸潤,溫育後小珠洗滌的條件一致(有專用洗珠器)及便於將小珠轉移至對應的測量管內,故宜選用圓盤型反應盤。