3 血液半乳糖的醫學檢查
3.1 檢查名稱
3.2 分類
3.3 血液半乳糖的測定原理
半乳糖氧化酶催化半乳糖被空氣中的氧氧化生成的半乳已二醛糖和過氧化化氫,後者被過氧化物酶催化放出氧,使色原性氧受體被氧化呈色。
3.4 試劑
(1)磷酸鹽緩衝液(0.02mol/L pH7.4):溶解磷酸二氫鉀1.06g和磷酸氫二鈉1.74g於950ml蒸餾水中,調節pH7.0,然後稀釋到1000ml。
(2)半乳糖氧化酶:稱取約1mg(相當30u)的半乳糖氧化酶乾粉,置於乳鉢中,加緩衝液研磨助溶,最後加緩衝液至50ml,過濾,此液可在冰箱保存數天。
(3)顯色劑:溶解10mg過氧化化氫酶乾粉於500ml緩衝液中,加入10g/L鄰聯茴香胺甲醇溶液5ml,置冰箱保存。如溶液顏色變深,空白吸光度增高,則應棄去,重新配製。
(4)硫酸溶液30%(V/V):小心加濃硫酸300ml於700ml蒸餾水中。
(5)氫氧化鋇溶液(0.15mol/L):溶解47g氫氧化鋇(Ba(OH)2·8H2O)於新蒸餾水或煮沸的去離子水中,然後稀釋至1000ml,如溶液出現混濁,則將瓶口塞緊,在室溫中放置數日,取上清液應用。氫氧化鋇能吸收空氣中的二氧化化碳生成碳酸鋇沉澱。
(6)硫酸鋅溶液(0.175mol/L):稱取新結晶的硫酸鋅(Zn SO4·7H2O)50g,以蒸餾水溶解並加至1000ml。
(7)半乳糖標準貯存液(10g/L):溶解D(+)半乳糖1g於蒸餾水中,稀釋至100ml。
(8)半乳糖標準應用液:取貯存液1ml,2ml,分別以蒸餾水稀釋到100ml,其濃度分別爲0.55mmol/L,1.1mmol/L的半乳糖標準應用液。
3.5 操作方法
(1)取蒸餾水0.5ml,血清0.1ml,0.15mol/L氫氧化鋇0.2ml,混勻,加0.175mol/L硫酸鋅0.2ml,混勻離心沉澱,製成1/10的去蛋白血濾液。
(2)按表1所列順序進行操作。
混勻,用分光光度計530nm以空白管調零,讀取各管吸光度
3.6 正常值
成人 0mmol/L;
兒童 1.1mmol/L。
3.7 化驗結果臨牀意義
正常成人血及尿中不含或僅有微量半乳糖,哺乳期婦女及新生兒血及尿中有時可有少量半乳糖,先天性半乳糖代謝障礙的患者血液及尿中可出現半乳糖。甲狀腺機能亢進時指數增高,肝炎病患者半乳糖指數升高,疾病緩解後指數下降。
3.8 附註
(1)尿中半乳糖參考值:新生兒<3.33mmol/L;嬰兒至成人(24h)<0.08mmol。
(2)血清半乳糖升高也可見於飯後、情緒緊張、使用激素治療等。