2 英文參考
rh-insulin[湘雅醫學專業詞典]
3 重組人胰島素藥典標準
3.1 品名
3.1.1 中文名
3.1.2 漢語拼音
Chongzu Ren Yidaosu
3.1.3 英文名
Recombinant Human Insulin
3.2 結構式
3.3 分子式與分子量
C257H383N65O77S= 5807.69
3.4 來源（名稱）、含量（效價）
本品爲重組技術生產的由51個氨基酸殘基組成的蛋白質。按乾燥品計算，含重組人胰島素（包括A21脫氨人胰島素）應爲95.0%～105.0%。
每1單位重組人胰島素相當於0.0347mg。
3.5 性狀
本品爲白色或類白色的結晶性粉末。
本品在水、乙醇和乙醚中幾乎不溶，在稀鹽酸和稀氫氧化鈉溶液中易溶。
3.6 鑑別
（1）在含量測定項下記錄的色譜圖中，供試品溶液主峯的保留時間應與對照品溶液主峯的保留時間一致。
（2）取本品適量，用0.1%三氟醋酸溶液製成每1ml中含10mg的溶液，取20μl，加0.2mol/L三羥甲基氨基甲烷－鹽酸緩衝液（pH 7.3）20μl、0.1% V8酶溶液20μl與水140μl，混勻，置37℃水浴中2小時後，加磷酸3μl，作爲供試品溶液；另取重組人胰島素對照品適量，同法制備，作爲對照品溶液。照含量測定項下的色譜條件，以0.2mol/L硫酸鹽緩衝液（pH 2.3）－乙腈（90：10）爲流動相A，乙腈－水（50：50）爲流動相B，按下表進行梯度洗脫。取對照品溶液和供試品溶液各25μl，分別注入液相色譜儀，記錄色譜圖，供試品溶液的肽圖譜應與對照品溶液的肽圖譜一致。
時間（分） | 流動相A（%） | 流動相B（%） |
0 | 90 | 10 |
5 | 80 | 20 |
45 | 40 | 60 |
50 | 40 | 60 |
3.7 檢查
3.7.1 有關物質
取本品適量，加0.01mol/L鹽酸溶液溶解並製成每1ml中含3.5mg的溶液，作爲供試品溶液。照含量測定項下的色譜條件，以0.2mol/L硫酸鹽緩衝液（pH 2.3）－乙腈（82：18）爲流動相A，乙腈－水（50：50）爲流動相B，按下表進行梯度洗脫。調節流動相比例使重組人胰島素主峯的保留時間約爲25分鐘，系統適用性試驗應符合含量測定項下的規定。取供試品溶液20μl注入液相色譜儀，記錄色譜圖，按峯面積歸一化法計算，含A21脫氨人胰島素不得大於1.5%，其他雜質峯面積之和不得大於2.0%。
時間（分） | 流動相A（%） | 流動相B（%） |
0 | 78 | 22 |
36 | 78 | 22 |
61 | 33 | 67 |
67 | 33 | 67 |
3.7.2 高分子蛋白質
取本品適量，加0.01mol/L鹽酸溶液溶解並製成每1ml中約含4mg的溶液，作爲供試品溶液。照分子排阻色譜法（2010年版藥典二部附錄Ⅴ H）試驗。以親水改性硅膠爲填充劑（5～10μm）；冰醋酸－乙腈－0.1%精氨酸溶液（15：20：65）爲流動相；流速爲每分鐘0.5ml;檢測波長爲276nm。取重組人胰島素單體－二聚體對照品，用0.01mol/L鹽酸溶液製成每1ml中約含4mg的溶液；取100μl注入液相色譜儀，重組人胰島素單體峯與二聚體峯的分離度應符合要求。取供試品溶液100μl，注入液相色譜儀，記錄色譜圖，扣除保留時間大於人胰島素主峯的其他峯面積，按峯面積歸一化法計算，保留時間小於人胰島素主峯的所有峯面積之和不得大於1.0%。
3.7.3 乾燥失重
取本品0.2g，在105℃乾燥至恆重，減失重量不得過10.0%（2010年版藥典二部附錄Ⅷ L）。
3.7.4 熾灼殘渣
取本品約0.2g，依法檢查（2010年版藥典二部附錄Ⅷ N），遺留殘渣不得過2.0%。
3.7.5 鋅
精密稱取本品適量，加0.01mol/L鹽酸溶液溶解並定量稀釋製成每1ml中約含0.1mg的溶液。另精密量取鋅單元素標準溶液（每1ml中含Zn 1000μg）適量，用0.01mol/L鹽酸溶液分別定量稀釋成每1ml中含鋅0.20μg、0.40μg、0.60μg、0.80μg、1.00μg與1.20μg的鋅標準溶液。照原子吸收分光光度法（2010年版藥典二部附錄Ⅳ D第一法），在213.9nm的波長處測定吸光度，按乾燥品計，含鋅（Zn）量不得大於1.0%。
（根據《中華人民共和國藥典》（2010年版 第一增補本）刪除原【檢查】無菌項[1]）。
3.7.6 微生物限度
取本品0.2g，依法檢查（2010年版藥典二部附錄XI J ），每lg中含細菌數不得過300cfu。[1]
3.7.7 細菌內毒素
取本品，依法檢查（2010年版藥典二部附錄Ⅺ E），每1mg重組人胰島素中含內毒素的量應小於10EU。
3.7.8 菌體蛋白殘留量
取本品適量，依法檢查（2010年版藥典三部附錄Ⅸ C），每1mg重組人胰島素中菌體蛋白殘留量不得過10ng。外源性DNA殘留量 取本品適量，依法檢查（2010年版藥典三部附錄Ⅸ B），每1劑量重組人胰島素中宿主DNA不得過10ng。
3.7.9 生物活性
取本品適量，照胰島素生物測定法（2010年版藥典二部附錄Ⅻ G），每組的實驗動物數可減半，實驗採用隨機設計，照生物檢定統計法（2010年版藥典二部附錄Ⅺ V）中量反應平行線測定隨機設計法計算效價，每1mg的效價不得少於15單位。
3.8 含量測定
照高效液相色譜法（2010年版藥典二部附錄Ⅴ D）測定。
3.8.1 色譜條件與系統適用性試驗
用十八烷基硅烷鍵合硅膠爲填充劑（5～10μm）；0.2mol/L硫酸鹽緩衝液（取無水硫酸鈉28.4g，加水溶解後，加磷酸2.7ml、水800ml，用乙醇胺調節pH值至2.3，加水至1000ml）－乙腈（74：26）爲流動相；流速爲每分鐘1ml；柱溫爲40℃；檢測波長爲214nm。取系統適用性試驗溶液（取重組人胰島素對照品，加0.01mol/L鹽酸溶液溶解並製成每1ml中含1mg的溶液，室溫放置至少24小時）20μl，注入液相色譜儀，人胰島素峯與A21脫氨人胰島素峯（與人胰島素峯的相對保留時間約爲1.3）的分離度不小於1.8，拖尾因子不大於1.8。
3.8.2 測定法
取本品適量，精密稱定，加0.01mol/L鹽酸溶液溶解並定量稀釋製成每1ml中含0.35mg（約10單位）的溶液（臨用新配）。精密量取20μl注入液相色譜儀，記錄色譜圖；另取重組人胰島素對照品適量，同法測定。按外標法以人胰島素峯與A21脫氨人胰島素峯面積之和計算，即得。
3.9 類別
降血糖藥。
3.10 貯藏
3.11 製劑
（1）重組人胰島素注射液 （2）精蛋白重組人胰島素注射液
3.12 版本
《中華人民共和國藥典》2010年版
4 參考資料
- ^ [1] 國家藥典委員會．中華人民共和國藥典：2010年版：第一增補本[M]．北京：中國醫藥科技出版社，2010．